基因编辑细胞系

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基因编辑细胞系

背景说明

基因编辑是一种对靶基因或转录产物进行敲除、插入和定点突变等精确修饰的基因工程技术，主要通过人工核酸酶实现对基因组的特定基因序列的敲除、插入或精确修饰。CRISPR系统可批量地敲除或过表达某些基因，因此可用作筛选目标基因，再配合相应的功能实验，即可找出该生命活动或疾病中的关键目标基因。

集萃拥有成熟的CRISPR-Cas9体系，脱靶效应更低，编辑效率更高效；可以进行细胞基因敲除、基因敲入、基因过表达、Luciferase修饰等多种类型的基因编辑；可以根据不同细胞特点选择适宜的转染或感染方法（脂质体转染、电转染及慢病毒感染）。

服务流程

1. 意向分析

基因序列评估与分析
周期、风险点评估

2. 载体构建

质粒构建
病毒包装

3. 细胞转染

病毒感染
PB转座子系统
RNP

4. 单克隆制备

单克隆化
单克隆筛选

5. 质控

PCR/qRCR/WB/流式等
支原体无菌检测、生长曲线等

服务内容

专业的设计和检测团队，可提供载体构建、过表达、干扰、基因敲除、基因敲入稳转细胞株构建及病毒包装与感染服务。构建系统多样，包括但不局限于CRISPR、Tet-On、PB转座子、慢病毒感染及质粒瞬转系统。

基因敲除（Gene Knockout）是研究基因功能的核心技术之一，通过定向删除或失活目标基因，揭示其在生理病理过程中的分子机制。我们提供专业化的基因敲除细胞系构建服务，结合CRISPR-Cas9、TALEN或ZFN等前沿基因编辑技术，为您量身定制高敲除效率、低脱靶效应的细胞模型。

服务类型	周期	交付标准	相关检测
基因敲除（KO)	稳转Cell Pool（4周起）单克隆（8周起）最终决定于靶点的复杂程度及细胞培养难度	稳转Cell Pool，12管或单克隆，1-52管	策略、PCR+测序
基因点突变（PM)	稳转Cell Pool（6周起）单克隆（10周起）最终决定于靶点的复杂程度及细胞培养难度		策略、PCR+测序
基因敲入（KI)	稳转Cell Pool（6周起）单克隆（12周起）最终决定于靶点的复杂程度及细胞培养难度		策略、PCR+测序
靶点过表达稳转	稳转Cell Pool（6周起）单克隆（10周起）最终决定于靶点的复杂程度及插入情况及细胞培养难度		策略、PCR+蛋白检
Luc过表达稳转株	稳转Cell Pool （3周起）单克隆（6周起）最终决定于细胞的培养及转染难度		流式+体外Luc检测

服务优势

技术成熟

拥有成熟的基因编辑技术平台，多种系统可满足各类编辑需求

经验丰富

超3万例基因编辑项目经验；300+种细胞培养及200+种靶点改造经验

服务完善

拥有专业经验丰富的项目管理团队及强大技术支持，满足多方位不同需求定制

质控严格

无菌率及支原体阴性100%，提供基因编辑细胞的蛋白表达水平鉴定

Cancer Types	List of WT Cell Lines	List of Modified Cell Lines	Background
Breast Cancer	4T1	hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)	BALB/c
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)
		hHER2 (Tg)
		hHER2(Tg)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)
		hEGFRVIII (Tg)-mEGFRVIII(KO)
		hEGFR (Tg)-mEgfr(KO)
		hEpCAM(Tg)-mEpcam(KO)
		hNECTIN4 (Tg)-mNectin4(KO)
		hGCPII (Tg)-mGcpII(KO)
	EMT6	hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)	BALB/c
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)
		hCD39(Tg)-mCd39(KO)
Colorectal Cancer	CT26	hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)	BALB/c
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD24(Tg)-mCd24(KO）
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD39(Tg)-mCd39(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD73(Tg)-mCd73(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD39(Tg)-mCd39(KO)-hCD73(Tg)-mCd73(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hNECTIN2(hCD112)(Tg) -mNectin2(mCd112)(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD155(Tg)-mCd155(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hB7H3(Tg)-mB7h3(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hTNFR2 (Tg)-mTnfr2(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-mCLDN18.2(Tg)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hVEGFA(Tg)-mVegfa(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hHVEM(Tg)-mHvem(KO)
		hCD30(Tg)-mCd30(KO)
		hCD47 (Tg)-mCd47(KO)
		hCD47(Tg)-mCd47(KO)-mPdl1(KO)
		hCD47(Tg)-mCd47(KO)-hCD24(Tg)-mCd24(KO）
		hCD70(Tg)-mCd70(KO)
		hCD73 (Tg)-mCd73(KO)
		hCD155(Tg)-mCd155(KO)
		hHER2 (Tg)
		hHER2(Tg)-mHer2(KO)
		hHER2(Tg)-hHER3(Tg)
		hHER2(Tg)-hHER3(Tg)-mHer3(KO)
		hEGFR (Tg)-mEgfr(KO)
		hCD24(Tg)-mCd24(KO）
		hNECTIN4 (Tg)-mNectin4(KO)
		h5T4(Tg)-m5t4(KO)
		mB2m(KO)
		mB2M(KO)-hB2M-hHLA-G(Tg)
		HLA-E-hB2M-Peptide(Tg)
		hClaudin18.2(Tg)-mClaudin18.2(KO)
		hCEACAM5(Tg)-mCeacam5(KO)
		hDLL3(Tg)-mDll3(KO)
		hGDF15(Tg)-mGdf15(KO)
		hGPRC5D(Tg)-mGprc5d(KO)
		hLRRC15(Tg)-mLrrc15(KO)
		hROR1(Tg)-mRor1(KO)
		hSSTR2(Tg)-mSstr2(KO)
		hTNFR2 (Tg)-mTnfr2(KO)
		hTACSTD2(Tg)
		hTACSTD2(Tg)-mTacstd2(KO)
		hVEGFA(Tg)-mVegfa(KO)
		hVTCN1(Tg)-mVtcn1(KO)
	MC38	hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)	C57BL/6
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD24A(CD24)(Tg)-mCd24A(Cd24)(KO）
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD73(Tg)-mCd73(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hB7H3(Tg)-mB7h3(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-mClaudin18.2(Tg)
		hCD24A(CD24)(Tg)-mCd24A(Cd24)(KO）
		hCD30(Tg)-mCd30(KO)
		hCD38(Tg)-mCd38(KO)
		hCD47 (Tg)-mCd47(KO)
		hCD47(Tg)-mCd47(KO)-hCd24(Tg)-mCd24(KO）
		hCD70(Tg)-mCd70(KO)
		hCD73 (Tg)
		hHER2(Tg）
		hHER2(Tg)-mHer2(KO)
		hEGFR(Tg)-mEgfr(KO)
		hNECTIN4 (Tg)-mNectin4(KO)
		mBcma(Tg)
		hClaudin18.2(Tg)-mClaudin18.2(KO)
		hCEACAM5(Tg)-mCeacam5(KO)
hCSF1(Tg)-mCsf1(KO)
hFAP(Tg)-mFap(KO)
mGdf15(TG)
hGDF15(Tg)-mGdf15(KO)
hHLA2(Tg)
hROR1(Tg)-mRor1(KO)
hSIGLEC15 (Tg)-mSiglec15(KO)
mStk11(KO)
hTACSTD2(Tg)
hTACSTD2(Tg)-mTacstd2(KO)
hTNFR2 (Tg)-mTnfr2(KO)
Lymphoma	A20	hCD19(Tg)-mCd19(KO)-Luc	BALB/c
		hCD20(Tg)
		hCD20(Tg)-mCd20(KO)-Luc
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-Luc
		hGPRC5D (Tg)-mGprc5d(KO)
	MOPC315	hBCMA(Tg)-mBcma(KO)	BALB/c
	J558	mBcma(Tg)	BALB/c
Melanoma	B16F10	hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)	C57BL/6
Melanoma	A375	hHLA-G(Tg)	Human
Lung Cancer	LLC1	hSIGLEC15(Tg)-mSiglec15(KO)	C57BL/6
Liver Cancer	H22	hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)	BALB/c
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-Luc
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hCD47(Tg)-mCd47(KO)
		hPDL1(Tg)-mPdl1(KO)-hNECTIN2(hCD112)(Tg) mNectin2(mCd112)(KO)
Gastric Carcinoma	NUGC4	hClaudin18.2(Tg)-mClaudin18.2(KO)-Luc	Human