技术服务
TECHNICAL SERVICE
讲座交流
人类菌群的载体筛选靶向微生物的各类药物和治疗方案
点击申请
huHSC-NCG-IL15

IL15(白细胞介素-15)是一种多效性细胞因子,由活化的单核-巨噬细胞、表皮细胞和成纤维细胞等多种细胞产生,发挥类似IL2的生物学活性,具有激活T细胞、B细胞和NK细胞,并可介导这些细胞的增殖和存活功能。集萃药康在NCG 小鼠模型上进行人源化 IL15 基因的敲入,获得二代NCG品系NCG-hIL15,该小鼠可支持人源 NK 细胞的定植及活性。

huHSC-NCG-hIL15是将人造血干细胞 (CD34+HSC)移植到NCG-hIL15小鼠中从而获得的重建人免疫系统的模型。该模型能重建有功能性的T细胞和NK细胞,生存周期大于39周,可用于肿瘤免疫治疗药物的研究。


huHSC-NCG-hIL15应用

· 用于人源细胞、组织移植;

· 接种人源肿瘤用于筛选相关药物,特别是基于ADCC作用的药效评价;

· 用于人类造血系统和免疫系统研究。


业务详情

1. NCG-hIL15小鼠外周血中人源IL15表达水平


NCG-hIL15人源化小鼠的杂合子及纯合子中均能检测到人源IL15的表达,纯合子表达水平高于杂合子。


2. huHSC-NCG-hIL15重建效果鉴定,重建T、NK细胞


huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中各免疫细胞的重建水平。于7、9、11、13周收集huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血,采用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠及huHSC-NCG-hIL15小鼠人源化进程。检测指标为hCD45, hCD3, hCD19, hCD4, hCD8, hCD56。随着免疫重建进程,5周左右huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中hCD45+白细胞水平在已达20%以上,其中hCD3+ T细胞水平逐渐增加,且分化出hCD4+及hCD8+ T细胞亚群。与huHSCNCG小鼠相比,CD56+NK细胞重建水平明显升高。


3. huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中NK细胞功能基因表达检测


于13周收集huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血,采用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中重建的人源NK细胞功能基因表达情况。检测指标为CD56、CD16、KIR3DL、NKG2D。与huHSC-NCG相比,huHSC-NCG-hIL15小鼠人源NK细胞重建水平显著升高,且可以表达KIR3DL、NKG2D功能性蛋白。


4. 基于huHSC-NCG-hIL15的体外药效实验


NCG-hIL15小鼠中移植人源造血干细胞HSC重建NK细胞杀伤及ADCC作用

随着效靶比的增加(NK:K562=2: 1,5: 1,10: 1),NCG-hIL15人源化小鼠重建NK细胞对于人慢性髓系白血病细胞K562的杀伤率也随之增加。随着效靶比的增加(NK:Raji=2: 1,5: 1),NCG-hIL15人源化小鼠重建NK细胞对于Raji细胞的杀伤率也随之增加。加入0μg/mL及10μg/mL的Rituximab(靶向CD20抗体,主要通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用ADCC杀伤CD20+肿瘤细胞),Rituximab抗体通过NK细胞介导的ADCC作用,对Raji细胞的杀伤作用进一步增强。


5. 基于HuHSC-NCG-hIL15的体内药效实验


将对数生长期人淋巴瘤细胞Raji细胞接种到huHSC-NCG-hIL15小鼠皮下,待肿瘤生长至平均体积约40-50 mm3时,随机分为PBS组,Rituximab给药组及Blincyto给药组,并使用相应的药物进行治疗。结果显示Rituximab组(TGI=48.95%)及Blincyto组(TGI=59.67%)对huHSC-NCG-hIL15的Raji细胞荷瘤鼠上肿瘤生长有抑制作用。


联系客服
提交