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  • 客户提供的细胞荷瘤不成功怎么办?

    客户提供的细胞在项目中没有成功成瘤怎么办?

    这种情况是会出现的,由于细胞特性的不同、在动物体内生长环境和培养皿环境的不同,会带来细胞不同生长趋势的结果,也和细胞接种量、动物选择性有关。所以,建议对于新改造的或新购买的细胞,不要直接开展大规模的药效,而是先做小规模的成瘤性测试,摸索成瘤条件,避免造成不必要的损失。


  • 客户能提供细胞进行成瘤或药效实验么?

    客户自己培养的细胞系能否接来做成瘤或药效实验?

    可以的。客户需要提供支原体检测报告,我司会做支原体检测复核。因支原体是SPF动物房禁止带入的微生物,也会对成瘤性测试或药效实验带来不准确的实验结果。客户可提供该细胞的小样,支原体检测报告为阴性的时候,方可启动正式实验,正式实验细胞注射后还会留取小样再进行复核。


  • 为什么huHSC免疫重建需要辐照

    为什么huHSC免疫重建需要辐照,而PBMC不需要?

    亚致死剂量的清髓(清除的不全是干细胞),目的是为了提高huHSC移植后小鼠体内的重建水平。PBMC为外周血单个核细胞,该方法可以在较短时间内实现快速的免疫系统重建,小鼠不需要提前清髓处理。


  • 影响CDX荷瘤效果的因素

    (1)细胞株自身的成瘤性:不同细胞株的成瘤快慢会有差异,建议正式实验之前摸索细胞株成瘤性或参考已发文献;

    (2)细胞接种时的状态及活率:建议取处于对数期生长的细胞进行接种,避免体外过度传代影响细胞状态,接种前对细胞活率进行检测;

    (3)支原体污染:建议接种前对细胞进行支原体检测;

    (4)接种的剂量:不同的细胞系、不同的小鼠周龄和接种位置所需要的细胞剂量会有差异,建议正式实验之前摸索出最佳细胞注射剂量;

    (5)接种方式:常用的接种部位有皮下、尾静脉和原位。建议根据细胞株成瘤性和实验目的选择合适的接种部位;

    (6)选择的免疫缺陷小鼠:不同免疫缺陷程度的小鼠或不同周龄小鼠的成瘤速度有所差异,建议根据预实验结果选择合适的动物模型;

    (7)其他辅助因子:根据细胞株类型选择实验中是否需要添加辅助因子;

    (8)适应性饲养:小鼠在运输过程中会产生应激反应,使小鼠出现一系列的病理生理学变化,这些变化会增加某些实验误差,因此在接到动物后应尽量避免立即进行实验,建议让动物有1~2周的适应期。

    荷瘤实验是否成功受很多因素的影响,以上建议仅供参考。另外,个体差异和肿瘤生长的速度不完全同步,实验中建议适当增加小鼠的富余量。




  • 小鼠异种移植肿瘤模型 CDX 与 PDX

    相同点:肿瘤组织或者细胞来源于癌症病人

    不同点:PDX是病人的肿瘤组织瘤块,保留了肿瘤的微环境和异质性,个体间差异较大,建模与临床更为接近,但PDX生长周期较长,均一性较差。药康大部分PDX样本为冻存状态,药效周期为:复苏接种小鼠生长至可传代(2-4个月)+传代后生长给药评价药效(2-4个月)共需约4-8个月时间,不同PDX肿瘤周期差异较大。

    CDX是经过体外建立的稳定细胞株,细胞荷瘤均一性较好,个体间的一致性较高,但CDX生长较快,一般细胞扩大培养(10~15天)+接种小鼠给药评价(1.5~2.5个月),周期较短。

    应用差异:CDX可用于药物的初期筛选,有前人研究结果,细胞背景比较清晰。PDX对于个体而言,可用于精准医疗,筛选更为合适的药物;对于药企而言,可用于药物受众的筛选,选择更加准确的适应症。




  • 小鼠肿瘤移植模型的分类

    根据供体和受体的来源不同,分为两类。

    1)异种移植模型(Xenograft transplantation model),选用人源的肿瘤,接种到免疫缺陷小鼠皮下,一般用于化疗药物、ADC药物、细胞治疗等筛选;

    2)同种移植模型(Allograft transplantation model),选用鼠源的肿瘤,接种到免疫正常的同背景小鼠皮下,可用于免疫类药物的筛选。